論文解析 | BeaverBeads? Streptavidin應(yīng)用于研究肝X受體在胸腺細胞發(fā)育中的作用
第三軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院周新元教授團隊在Cellular & Molecular Immunology上發(fā)表文章，表明肝X受體β型通過調(diào)節(jié)IL-7Rα的表達對單陽性胸腺細胞的存活起重要作用。
T淋巴細胞，包括CD8+和CD4+ T細胞，是細胞和體液免疫反應(yīng)的重要介質(zhì)，在胸腺中按發(fā)育階段產(chǎn)生。肝X受體(Liver X receptor, LXRs)是脂質(zhì)代謝中的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，在T細胞增殖中發(fā)揮重要作用。然而，肝X受體是否在胸腺細胞發(fā)育中發(fā)揮作用仍不清楚。在本文中，研究者們提出了肝X受體β型通過直接結(jié)合到Il7r基因的5′-調(diào)控區(qū)，促進Il7r基因轉(zhuǎn)錄，進而正調(diào)節(jié)單陽性淋巴細胞的存活。
2020年，第三軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院周新元教授團隊在Cellular & Molecular Immunology上發(fā)表文章《Liver X receptor β is required for the survival of single-positive thymocytes by regulating IL-7Rα expression》 表明肝X受體β型通過調(diào)節(jié)IL-7Rα的表達對單陽性胸腺細胞的存活起重要作用。
為驗證這一猜想，研究者檢測了在LXRα缺失，LXRβ缺失和野生型小鼠中初始T細胞的數(shù)量和頻率。為了避免LXRβ被敲除后胸腺微觀環(huán)境改變可能導(dǎo)致的影響，研究者使用 LSK (Lin–Sca-1+c-Kit+)細胞混合物生產(chǎn)了輻照變異的骨髓嵌合體小鼠。其中敲除LXRβ和野生型小鼠的數(shù)量比為1：1。為了制作骨髓嵌合體，共2000個無LXRβ 的 LSK（Lin–Sca-1+c-Kit+)細胞分別用含有LXRβ、IL-7Rα、Bcl2或空編碼序列的逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)染到致命性輻射受體小鼠中，12周重組之后進行分析。
其中，Lin-細胞的富集是通過磁珠分選的方法。通過鏈霉親和素和生物素的相互作用，將生物素化的Lin+標記物固定在BeaverBeads? Strepavidin 鏈霉親和素磁珠上，利用磁珠去除Lin+細胞。
研究結(jié)果顯示，缺失了LXRβ的胸腺細胞分布明顯減少了。這種減少包括CD4單陽性和TCRβ+CD8單陽性。同時，雙陰性，未成熟單陽性和雙陽性胸腺細胞數(shù)與野生型小鼠的比沒有明顯變化。另外，缺失了LXRβ的鼠源CD4+ 和CD8+ T脾細胞數(shù)量也有非常明顯的下降。這些數(shù)據(jù)顯示肝X受體β型對單陽性胸腺細胞的存活起重要作用。
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 型號 | 應(yīng)用推薦 |
10 mg/mL, 300 nm | 化學(xué)發(fā)光，細胞分選，探針捕獲 | ||
10 mg/mL, 1 μm | 化學(xué)發(fā)光，探針捕獲 | ||
10 mg/mL, 5 μm | 細胞激活 | ||
10 mg/mL, 2.8 μm | 化學(xué)發(fā)光，探針捕獲 | ||
磁性分離器2/15 | 適用于1.5mL, 2mL, 15mL tubes | ||
